文章摘要:运用UPLC-Q-TOF-MS、网络药理学和实验验证探讨穴位贴敷（acupoint sticking therapy，AST）干预支气管哮喘（bronchial asthma， BA）的作用机制。TCMSP数据库中检索白芥子、延胡索、甘遂、细辛和生姜的化学成分作为自建库，采用UPLC-Q-TOF-MS解析AST中的活性成分，在TCMSP和SwissTargetPrediction中筛选靶点；在GeneCards中收集BA靶点，运用Venn 2.1.0平台，对活性成分靶点与BA靶点取交集获得潜在靶点；将潜在靶点导入STRING和DAVID中进行PPI、GO和KEGG分析；建立屋尘螨（house dust mite， HDM）诱导的哮喘小鼠，通过肺功能、免疫印迹法（Western blot）和流式细胞术（flow cytometry）等研究AST对哮喘小鼠的作用机制。结果显示，UPLC-Q-TOF-MS得到54个活性成分，交集得到162个潜在靶点，选取前53个作为关键靶点。PPI分析、GO和KEGG分析发现，AST可能通过清风藤碱、芥子酸、二氢辣椒素、6-姜酚等活性成分，作用于SRC、PIK3CA等靶点，调节PI3K-AKT、ErbB、趋化因子、Sphingolipid等信号通路以干预BA病理机制。AST能改善哮喘小鼠肺功能，下调肺组织中PI3K和p-AKT蛋白表达，增强PETN蛋白表达以及降低肺组织中Ⅱ型固有免疫细胞（typeⅡ innate lymphoid cells， ILC2s）水平。综上可得，AST可能主要通过下调PI3K-AKT通路，抑制ILC2s，从而减轻哮喘气道炎症、降低气道高反应等。

文章关键词:UPLC-Q-TOF-MS,网络药理学,穴位贴敷,支气管哮喘,实验验证,

项目基金:国家自然科学基金项目（81674065）,江苏省研究生科研与实践创新计划项目（SJCX21＿0779）,